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八月瓜脱毒苗培育方法
添加时间:2018-03-30

1.热处理脱毒
热处理一般选生长旺盛、有发达根系的盆栽苗木,经越冬后置于热处理箱内进行处理,箱内温度和湿度能自控,放置温室中,利用温室的阳光,使处理的八月瓜植株能正常生活。在38℃±1℃的温度条件下,处理2~3个月后,剪取长0.5~lmm或更短的材料进行组织培养,便可获得无病毒苗木。各种病毒脱毒的温度和时间长短有一定差异。近年来,为了减轻热处理对苗木的损伤,将恒温改成变温(35~40℃)处理,也可以脱除某些病毒,如白天39~40℃,夜间35~36℃,经3个月可脱除无味果病毒。
八月瓜脱毒苗培育方法(图1)
2.茎尖培养脱毒
采用生物技术即茎尖培养方法,可脱除某些病毒。实践证明,Deux单用热处理和茎尖培养脱毒,均难脱除卷叶病、茎痘病和栓皮病等病毒,如两种方法结合应用,可提高脱毒效果,获得较可靠的无毒苗。植株经过热处理后,切下2~3cm长的八月瓜顶芽和侧芽,剪去叶片,经无菌化处理后,取0.5mm茎尖接种于盛有分化培养基的试管或三角瓶中,每管(瓶)接种1个茎尖,在24~29℃,2000lk光照下培养,6周后进行转接,取5mm长的幼芽在150mL的三角瓶中继代培养成苗。经过继代和生根培养基,培养6个月后即得大量试管苗。
八月瓜脱毒苗培育方法(图2)

3.病毒检测
经过热处理结合茎尖培养获得的组培苗要经过病毒检测,证明已经脱毒,才能按无毒苗繁殖使用。检测病毒现采用以下两种方法:
(1)指示植物检测法使用的木本指示植物有紫丫八月瓜,麻瓜等。这些指示植物能检测全球发生的各种重要病毒和不同的株系。绿枝嫁接是目前常采用的方法,一般在温室进行。在露地检测,需要的时间则较长。经过两个生长季节的重复检测后才能确定为无病毒植株。一些需要很长时间才表现症状的病害,如茎痘病、栓皮病,露地嫁接观察也是需要的。
(2)酶联免疫吸附检测法酶联免疫吸附法简称ELISA,是利用血清技术快速检测病毒的一种方法。该法灵敏、快速,且无须很复杂的设备条件就能大量做检测,因此,是目前世界各国普遍采用的一种方法。酶联法有两种,即直接酶联和间接酶联,前者提出较早,是抗体和抗原直接结合,最后微型板是否呈现黄色反应而确定是否带毒;后来演变有间接酶联,即抗体和抗原不直接结合而是间接结合的。
八月瓜脱毒苗培育方法(图3)
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